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细想分光光度计的步骤与方法

 发布时间:2020-03-19 点击量:719
   分光光度计是采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们知道如何使用分光光度计的步骤吗?
  预热仪器:为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。
  选定波长:根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。
  固定灵敏度档:根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度读数为0.2~0.7,选择合适的灵敏度。为此,旋动灵敏度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
  调节“0”点:轻轻旋动调“0”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。
  调节T=100%:将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度T=100%,即,表头指针恰好指在T=100%处。
  测定:轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A,读数后,打开比色皿暗箱盖。
  关机:实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。